扩增_核酸扩增

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扩增_核酸扩增

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qPCR详解：原理步骤术语实时荧光定量PCR（Quantitative Real-time PCR），简称qPCR，是一种在DNA扩增体系中加入荧光基团，通过聚合酶链式反应（PCR）循环实现荧光信号的积累，从而检测每次PCR循环后产物总量的方法。它是核酸检测和定量分析的“金标准”。 qPCR的工作原理 🔬 qPCR的基本原理是在DNA扩增体系中加入荧光基团，通过PCR循环实现荧光信号的积累。这种方法可以实时监测PCR过程中的荧光信号变化，从而精确地测定DNA扩增的总量。荧光标记方法 🌈 根据所使用的荧光标记方法，qPCR可以分为两种：荧光染料法和荧光探针法。荧光染料法：SYBR Green染料是一种结合于所有双链DNA双螺旋小沟区域的染料。在反应体系中，当染料与DNA双链结合时，荧光信号会被放大，从而被仪器检测。染料的结合量与DNA的浓度成正比，因此可以通过检测荧光信号的强度来反映PCR体系中DNA的浓度。这种方法适用于任何双链DNA序列的扩增，操作简单，成本较低。荧光探针法：TaqMan荧光探针是由5’端的荧光报告基团、3’端的荧光淬灭基团和靶基因特异性结合的序列构成。当探针在反应体系中处于游离状态时，荧光报告基团的信号会被荧光淬灭基团所吸收。但当PCR进行到退火、延伸阶段时，DNA聚合酶会将荧光报告基团和荧光淬灭基团分离，从而发出荧光。因此，探针法也可以通过检测荧光信号强度来反应PCR体系中DNA的浓度。这种方法具有良好的特异性，无需实验优化，不同波长的荧光报告基团可以标记不同的探针，兼容多重反应。关键术语解释 📚 CT值：C代表Cycle，T代表Threshold，即指PCR在扩增过程中，扩增产物的荧光信号达到设定的荧光阈值时所对应的扩增循环数。惰性参比染料（ROX）：用作荧光信号标准化内部参照，可以逐孔校正因移液不准确、孔位置及荧光波动造成的变动。扩增曲线：随着PCR反应的进行，荧光信号强度随着扩增产物的增加逐渐增强，通过荧光强度来检测扩增产物的变化。扩增效率：一个DNA分子扩增为2个DNA分子，这种情况下的扩增效率为100%。实际上会出现偏高和偏低的情况，一般在90-110%之间。溶解曲线：扩增反应结束后，对双链DNA进行升温处理，此时DNA双链逐渐解开，染料脱落，荧光值下降，荧光值随温度变化的曲线即“溶解曲线”，可用来判断体系中是否含有引物二聚体和非特异性扩增。无模板对照（NTC）：扩增反应中，模板通常用水来代替，用于检测试剂污染或外源DNA造成的污染。实验步骤 🧪 上机反应：上机前设置样本信息和程序，上机前的样品需轻微离心，避免气泡，加完样品后立马上机。导出数据，实验分析：常见的计算公式包括：ΔCT=CT(目的基因)-CT(内参基因)，ΔΔCT=ΔCT(实验组)-ΔCT（对照组），RQ=2-ΔΔCT。 qPCR在生物医学研究中的应用 🧬 qPCR是一种高灵敏度和高特异性的分子生物学技术，广泛应用于基因表达分析、病原体检测、遗传疾病诊断等领域。它能够精确地测定基因表达水平、病毒载量等，为生物医学研究提供了重要的工具。[高特美图网内容审核编辑：徐小强]

如果观察到「牙周肉芽组织」具有明显的「橙红细菌荧光」，强烈建议积极去除，这些组织的细菌很难依靠药物来彻底清除，他们会在术后短暂的休眠，不出几日又开始扩增并再次导致继续牙周感染，循环往复，非常折磨人。当然，我们牙周领域有一个学说，认为肉芽组织是去不干净的，但真实的情况是，如果这个都不愿意去，哪牙周病真的不用治疗了。[高特美图网内容审核编辑：王鹏]

西九龙艺术中心新展：重温巴黎圣母院辉煌从12月8日开始，西九龙文化区将迎来一场视觉盛宴——《浴火重生——巴黎圣母院扩增实境沉浸式体验展》。这场展览将带你穿越时空，亲眼目睹巴黎圣母院从12世纪至今的800多年历史变迁，以及2019年那场毁灭性大火后的修复过程。每位参观者都将获得一台HistoPad触控平板电脑，通过简单的操作，你就可以沉浸在这场历史之旅中。设备支持13种语言，包括普通话，让不同国籍的游客都能轻松享受。展览中展出的文物和场景将通过AR技术重现历史，包括石像鬼复制品、大火中幸存的玫瑰窗的投影、雕塑，以及圣母院管风琴和钟声的环绕音效，让你仿佛置身于那个历史时刻。 📅 展览日期：2024年12月8日至2025年3月7日 📍 展览地点：西九文化区博物馆道22号艺术公园地下GF-01-03号铺Visionairs 🎫 门票价格：早鸟门票（即日起至12月7日）：$248 标准门票（2024年12月8日至2025年3月7日）：$298 特惠门票（适用于12岁或以下访客、全日制学生及65岁或以上长者）：$198 优惠四人套票（适用于12岁或以下访客、全日制学生及65岁或以上长者）：$792 优惠六人套票（适用于12岁或以下访客、全日制学生及65岁或以上长者）：$1,188 成人四人套票：$1,192 成人六人套票：$1,788 无论你是历史爱好者，还是只是想找个地方打发周末，这场展览都值得一去。快来西九龙艺术中心，感受巴黎圣母院的魅力吧！[高特美图网内容审核编辑：何功利]

EGFR+MET扩增：FLOWERS研究 #肺癌#[高特美图网内容审核编辑：徐小强]

「赵露思超话」赵露思✖️Charlotte Tilbury 赵露思官宣出任Charlotte Tilbury品牌全球彩妆代言人，又一全球代言商务合约到手，商业版图持续扩增，恭喜赵露思👏 「ct全球彩妆代言人赵露思」[高特美图网内容审核编辑：段志强]

大连家电补贴扩增！全年立减2000元！ 🎉大连家电补贴范围大扩！ 📅 补贴时间：2023年9月1日至2025年12月31日 👥 补贴对象：个人消费者在活动期间购买指定家电产品 🛒 补贴范围和标准： 1️⃣ 国家确定的12类家电产品：冰箱（含冰柜、冷柜、冰吧）、洗衣机（含洗烘一体机）、电视、空调（含家用中央空调）、电脑（包括台式、笔记本）、热水器（含壁挂炉、小厨宝）、家用灶具（含集成灶）、吸油烟机、净水器（含净饮机）、洗碗机、电饭煲（含电压力锅）、微波炉。补贴标准：销售价格的15%，购买1级及以上能效或水效标准的产品额外再给5%补贴。每位消费者每类产品可补贴1件，每件不超过2000元。 2️⃣ 大连市增扩的33类家电产品：干衣机（含烘干机、挂烫机）、衣物护理机、电磁炉、电烤箱（含电蒸箱、空气炸锅、微蒸烤一体机）、电火锅、烹饪机（含煎烤机）、料理机（含破壁机、榨汁机、豆浆机、绞肉机）、面包机（含三明治机）、炒菜机器人、饮水机、制冰机、消毒柜、咖啡机、茶吧机、电水壶（含煮茶器、养生壶）、空气净化器、投影仪、洗地机（含扫地机器人）、吸尘器、电动垃圾处理器、电风扇、电暖器（含暖风机）、除湿机、加湿器（含雾化器）、打印机、除螨仪、电吹风、理疗仪（含美容仪）、按摩椅、跑步机（含走步机）、浴霸、宠物喂食器、自动猫砂机。补贴标准：销售价格的15%，购买1级及以上能效或水效标准的产品额外再给5%补贴。每位消费者每类产品可补贴1件，每件不超过2000元。 🎁 补贴申领方式：通过云X付领取补贴权益，享受消费立减补贴。 📅 补贴权益有效期：自获取之日起1日内有效，逾期可再次领取。 🛒 补贴权益使用方式：在参与活动的经营主体购买政策适用范围内的家电产品时，可在订单支付环节享受一定比例立减补贴。[高特美图网内容审核编辑：何功利]

2025年5月双鱼座的运势如下: ·整体运势:5月是双鱼座的高峰月，整体运势较好，收入有所提升。 ·爱情运势:单身双鱼座在5月社交圈扩增，聚会中可能邂逅灵魂伴侣;有伴双鱼座在9月是关键，育儿/家务分歧易引发冷战，多用“撒娇式沟通”代替争吵。 ·事业运势:4-6月贵人运爆棚，跨部门项目、新领域合作找上门，展现创意能获领导青睐，薪资涨幅高达15%。·财富运势:5月偏财暗涌，适合黄金定投小额试水。 ·健康运势:养生要“润物细无声”，外卖党小心肠胃炎，随身带山药粉冲饮，艾灸中脘穴调理脾胃。需要注意的是，双鱼座在5月金星逆行期间，应慎防为朋友担保或合伙投资。[高特美图网内容审核编辑：段志强]

#健康跑# 【冲刺倒计时！拼手速了！】2025“奔跑江淮”和美乡村健康跑(界首站)受到广大跑友的热情支持，为了满足跑友们的参赛需求，经研究决定扩增亲子跑项目参赛名额200人。报名通道将于4月17日（今天）10:00开启，先到先得，报满即止。[高特美图网内容审核编辑：段志强]

荧光染料和探针在PCR中的神奇作用在荧光定量 PCR 中，荧光染料或探针扮演着至关重要的角色，它们的作用包括但不限于以下几点：特异性识别靶标序列：荧光探针能够精准地与目标 DNA 序列结合，从而确保检测的准确性，减少非特异性扩增带来的误差。产生荧光信号：当染料或探针与扩增产物结合后，在特定激发光下会发出荧光。实时监测扩增过程：通过检测荧光信号的强度变化，可以实时反映 PCR 反应进程中产物量的积累。定量分析：荧光信号的强度与扩增产物的量成正比，据此可以对起始模板的量进行精确的定量分析。区分特异性扩增和非特异性扩增：高质量的探针和染料能够有效区分真正的目标扩增产物和非特异性的扩增产物，提高检测的准确性。常见的荧光染料如 SYBR Green I 能嵌入所有的双链 DNA 中发出荧光；而荧光探针如 TaqMan 探针、分子信标等，在 PCR 检测中发挥着不可或缺的作用。[高特美图网内容审核编辑：徐小强]